Метод плр для аналізу крові

Відео: Визначення резус фактора плоду по крові матері методом ПЛР / "Гермедтех" (Одеса)

ПЛР (Поліразмерная Ланцюгова Реакція) - унікальний в своєму роді експериментальний метод молекулярної біології. В даний час це найефективніший спосіб діагностики інфекційних захворювань різної природи і форми протікання.

Розробка методу поліразмерной ланцюгової реакції почалася в 70-х роках минулого століття. На основі цих досліджень в 80-х роках американський вчений Керрі Мюлліса зробив відкриття, відзначене Нобелівської премії, яке дозволило використовувати метод ПЛР в аналізах крові в ході експериментів над ДНК.

Технологія методу ПЛР не так давно «вийшла» зі стін великих медичних лабораторій і в даний час широко використовується в клінічній практиці.

Метод ПЛР дозволяє проводити різні маніпуляції з генетичним матеріалом: багаторазово клонувати певні ділянки ДНК за допомогою ферментів, створювати мутації, об`єднувати ділянки ДНК. Клонування ураженої мікробами ДНК незамінне у випадках, коли збудники нечисленні. Розмножений в необхідних кількостях генетичний матеріал набагато легше піддається аналізу і ідентифікації. Крім якісної оцінки, оцінюється також кількість інфекційних збудників (так звана вірусне навантаження) в організмі людини, що має велике значення при діагностиці та лікуванні хронічних інфекційних захворювань. Чим вище концентрація інфекційних збудників в крові, тим вище ризик передачі захворювання при контактах з іншими людьми. Крім того, концентрацію вірусів розглядають як показник ефективності під час лікування: якщо вона знижується, то терапія проводиться успішно.

Дослідження на основі результатів методу ПЛР широко використовуються в медичній і біологічній практиці. Метод ПЛР став незамінним при діагностиці інфекційних та спадкових захворювань, а також при дослідженнях в області генетики (для клонування і виділення нових генів, встановлення батьківства, введення мутацій).

Незважаючи на свою новизну, метод ПЛР пройшов значну клінічну апробацію. Висока ефективність методу грунтується на його чутливості: досить мізерних кількостей біологічного матеріалу та всього декількох молекул збудника, щоб діагностувати тип і загальну картину захворювання. Використання методу дозволяє виявити некультивованих, важко культивовані або взагалі приховано існуючі форми мікроорганізмів, що викликають хронічні або латентні форми протікання захворювань. Величезна перевага роботи з поліразмерной ланцюговою реакцією полягає в тому, вона дозволяє відмовитися від вирощування таких мікроорганізмів в лабораторних умовах.

Ще однією перевагою методу є швидкість отримання результатів. Обробка результатів методу ПЛР проводиться автоматично і займає всього кілька годин, в той час як традиційні методи, зокрема посіви, можуть займати від декількох діб до декількох тижнів.

Дослідженню методом ПЛР підлягає будь-який біологічний матеріал: харкотиння, слина, сеча, сироватка, зішкріб епітеліальних клітин, мазок, сперма. Предметом нашого розгляду стане використання методу ПЛР в аналізах крові.

Як здавати аналіз крові для ПЛР досліджень

Підготовка до здачі ПЛР-аналізу крові не вимагає яких-небудь спеціальних обмежень. Коливання складу крові, які можуть бути викликані зміною раціону, фізичними навантаженнями і навіть стресами, не є показовими для даного дослідження. Єдине правило, якого необхідно дотримуватися перед тим, як робити ПЛР-аналіз крові, це витримування достатньої паузи після прийому курсу антибактеріальних препаратів, оскільки об`єктивна картина поширення збудників інфекції в організмі може бути змазана.

Відео: ПЛР аналіз - що це таке

В силу новизни технології виконання ПЛР-аналізу крові все ще залишається дорогим. Лабораторне обладнання та реактиви для виконання цього дослідження в основному поставляються з Європи і США, тому вартість діагностики одного виду інфекції може досягати тисячі рублів.

Застосування ПЛР-аналізу крові для діагностики захворювань

Областю застосування методу поліразмерной ланцюгової реакції є діагностика уреаплазмоза, мікоплазмозу, вірусних гепатитів В і С, хламідіозу, трихомоніазу, кандидозу, герпесу, туберкульозу, бактерій, що викликають виразкову хворобу і гастрит, папилломавирусов і вірусів імунодефіциту. Тому в призначенні на обстеження вказується той чи інший вид збудника: ПЛР-аналіз крові на туберкульоз, наприклад. Результатами здачі ПЛР-аналізів крові будуть висновки про наявність чи відсутність збудника, а також його кількостях.

Аналіз крові методом ПЛР є найбільш поширеною формою діагностики гострих і хронічних інфекційних захворювань в їх атипових і вірусних проявах. Труднощі діагностики подібних захворювань старими серологічними методами полягала в тому, що виявлення інфекцій вироблялося по виробленим організмом антитіл. Однак стан хворого не завжди дозволяє витримати час для вироблення антитіл.

Показовим прикладом у цьому сенсі є діагностика туберкульозу. Зараження туберкульозом відбувається повітряно-крапельним шляхом. Збудником хвороби є паличка Коха, що вражає легені. Симптоматика туберкульозу може бути змащеній, тому для ранньої діагностики цієї хвороби проводять всілякі допоміжні дослідження. З дитинства нам добре відома шкірна проба під назвою «реакція Манту». В організм вводиться доза ослаблених збудників туберкульозу, а потім оцінюється відгук імунної системи. Ця проба дуже часто викликає алергічні реакції, які можуть бути помилково витлумачені як наявність хвороби. Потім, щоб підтвердити або зняти підозри, лікар направляє пацієнта на флюорографію або аналіз харкотиння. ПЛР-аналіз крові на туберкульоз дозволяє виявити збудника за допомогою одноразового дослідження в короткі терміни з практично стовідсотковою гарантією точності без шкідливих впливів на організм. Крім того, ПЛР-аналіз крові на туберкульоз дозволяє деталізувати особливості захворювання: визначити концентрацію збудників в біологічному матеріалі, локалізувати вогнище інфекції, який може бути розташований не тільки в легенях, а й в інших органах або тканинах.

ПЛР-аналіз крові дуже ефективний при діагностиці вірусу імунодефіциту. Ця небезпечна хвороба не виявляє однозначних симптомів. Оскільки захисні сили організму блокуються, виявити в крові реакцію на чужорідний білок практично неможливо. У цих умовах єдиним способом вірною діагностики стає використання методу поліразмерной ланцюгової реакції, що забезпечує якісний результат за рахунок своєї гіперчутливості.

Інфекції є невід`ємними супутниками нашого життя з самого народження. Деякі протікають непомітно і без особливого збитку для здоров`я, інші вимагають серйозної діагностики і негайного лікування. У таких випадках точність постановки діагнозу відіграє визначальну роль. На жаль, старі методи лабораторних досліджень не завжди забезпечували достовірність результату.

Відео: Аналіз крові

Аналіз крові методом ПЛР в даний час зарекомендував себе як найнадійніший і оперативний вид діагностичних досліджень, що не вимагає спеціальної підготовки і здатний працювати з мінімальними обсягами інформації (у випадках, коли в біологічному матеріалі виявляються поодинокі збудники). Негайна здача ПЛР-аналізів крові дозволить вам найбільш ефективно перемогти хворобу. Будьте здорові!